Projeto 9

(para 10/11/2021, entrega até 24/11/2021)



Instale o programa MrBayes. O programa pode ser obtido aqui para várias plataformas. O manual do programa encontra-se aqui. Leia atentamente as suas instruções. Teste o programa usando esse conjunto de dados, que é fornecido junto com ele, conforme o manual : primates.nex.
Siga as instruções passo a passo do capítulo 2 do manual do MrBayes.
Os três arquivos abaixo têm o mesmo conjunto de sequências (trecho de DNA mitocondrial de 38 espécies de mamíferos).  Escolha cerca de umas 12 dessas sequências e use os programas MrBayes e MEGA para reconstruir a filogenia com os métodos de distância com bootstrap, máxima parcimônia (também com bootstrap, usando métodos heurísticos) e de inferência bayesiana. Se você tiver um pouco de paciência e usar heurísticas rápidas, é possível usar todas as sequências. Anote os parâmetros utilizados nas análises onde isso seja relevante (modelo usado na correção de distâncias, modelo de substituição nucleotídica, frequências nucleotídicas, sítios invariáveis, distribuição de taxas, etc.).  Compare os resultados obtidos e responda:

1. Houve diferenças nas topologias obtidas? Caso haja diferenças, verifique se elas foram em ramos curtos ou longos.
2. Compare os valores de bootstrap dos nós "equivalentes" obtidos nas análises de distâncias e de máxima parcimônia. O que você pode dizer a respeito dessa comparação?
3. Faça a reconstrução filogenética com o método bayesiano com o programa MrBayes, usando como parâmetros o modelo GTR + gama (6 categorias). Compare os valores de bootstrap dos nós "equivalentes" das análises de distâncias e de máxima parcimônia com os valores de probabilidade "a posteriori" obtidos na análise Bayesiana. O que você pode dizer a respeito dessa comparação?
4. (opcional). Usando os dados de exemplo fornecidos com o programa MrBayes (primates.nex), faça o teste para relógio molecular rigoroso (item 4.5, página 57 do manual do MrBayes). Faça o teste com o mesmo conjunto de dados do trecho do genoma mitocondrial de mamíferos que você vem usando.
5. (opcional). Repita as análises com o programa Beast2, que pode ser obtido aqui. Compare a análise (e também a praticidade e clareza das instruções) com aquela feita com o MrBayes.

Material

Arquivos com o mesmo alinhamento de um trecho da sequência do genoma mitocondrial de alguns mamíferos, contendo as sequências dos genes tRNA-Phe, rRNA 12S, tRNA-Val, rRNA 16S, tRNA-Leu e ND1.
trecho1_ali.fas, formato "fasta".
trecho1_ali.meg, formato "MEGA".
trecho1_ali.nex, Formato "Nexus".

OBS: Os arquivos NÃO contém a extensão ".txt" no final do nome. Programas de Windows tendem a adicionar automaticamente essa extensão.

Os mamíferos "novos" (além daqueles incluídos no projeto 4) são:
Meriones_meridianus = Meriones meridianus, Gerbil, roedor da Ásia, Rodentia, Muridae.

Ratinho da Ásia

Allocricetulus_eversmanni = Allocricetulus eversmanni, Hamster do Cazaquistão, Rodentia, Cricetidae.

Hamster do
      Cazaquistão

Callithrix_kuhlii = Callithrix kuhlii, Sagui de Wied, Primates, Cebidae.

Sagui de Wied

Homo_denisova = Sem nome científico ainda, Homem de Denisova, Primates, Hominidae.

Osso de denisova

Homo_sapiens_neanderthalensis = Homo sapiens neanderthalensis, Homem de Neandertal, Primates, Hominidae.

Homem de Neandertal

Nyctalus_noctula = Nyctalus noctula, Morcego arborícola grande. Chiroptera, Vespertilionidae.

morcego

Graphiurus_kelleni = Graphiurus kelleni, sem nome em português, "Kellen' s dormouse". Rodentia, Gliridae.